超高分辨率熒光顯微鏡的預(yù)檢查和調(diào)節(jié)

更新時(shí)間：2021-09-02

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Oxford Nanoimaging公司生產(chǎn)的新產(chǎn)品超分辨熒光顯微鏡-Nanoimager 是由牛津大學(xué)Achillefs Kapanidis教授團(tuán)隊(duì)經(jīng)過8年時(shí)間研發(fā)而成的，是一種新型的單分子顯微鏡，也是目前只此一款無需校準(zhǔn)、無需光學(xué)平臺(tái)、超小型臺(tái)式超分辨顯微鏡。Nanoimager突破了傳統(tǒng)光學(xué)的衍射極限，分辨率可達(dá)20nm，是臺(tái)大視野單分子FRET顯微鏡。

(1)每次進(jìn)行熒光觀測(cè)前，必須例行檢查熒光裝置的燈絲對(duì)中、光路對(duì)焦、孔徑光闌、視場(chǎng)光闌設(shè)置等狀況。

(2)所需要的熒光激發(fā)/發(fā)射濾光片組件是否已裝在轉(zhuǎn)換器中，物鏡配置是否得當(dāng)，除去物鏡前透鏡的油漬和灰塵。

(3)如同時(shí)進(jìn)行透射光相差觀察，要檢查聚光鏡對(duì)中心及相差環(huán)與物鏡相反的共軛情況。

(4)檢查樣品載體(載玻片、蓋玻片和其他器皿)有否掛有液體、灰塵，厚度是否在物鏡標(biāo)定的工作距離范圍內(nèi)。切片樣品不能太厚，約≤10μm為宜。

(5)因照明光源含有紫外線，在載物臺(tái)前上方放一塊棕色遮光板，以防紫外線損傷視網(wǎng)膜。

(6)電壓不穩(wěn)會(huì)降低高壓汞燈的使用壽命，光源電源最好加配穩(wěn)壓器。

(7)為延長(zhǎng)汞燈壽命，在開啟后15min方可關(guān)閉；汞燈熒光電源一旦關(guān)閉，再次啟動(dòng)至少需等待10min，以使水銀蒸汽冷卻復(fù)至原態(tài)，否則會(huì)影響燈的壽命。